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Keuchhusten Testergebnisse nicht eindeutig definieren

Das Public Health Laboratory Network hat eine Standardfalldefinition für die Diagnose von Krankheiten entwickelt, die in Australien meldepflichtig sind. Diese Seite enthält die Laborfalldefinition für Pertussis. Pertussis - Bordetella pertussis - Keuchhusten 1.

Diese Vorgehensweise wird empfohlen. Die Angabe der ausgewählten Ziele und die Einschränkungen des Assays sollten in den interpretativen Kommentaren enthalten sein. Ganze Zelle B. Positive Ergebnisse sollten nicht als Hinweis auf eine aktuelle Infektion angesehen werden. Siehe Abschnitt 3. Es ist auf die Atemwege des Menschen beschränkt und wird von Tröpfchen von Person zu Person verbreitet. Das klinische Spektrum ist vielfältig und wird durch das Alter des Patienten, die vorherige Exposition gegenüber dem Organismus, die Impfanamnese, die Verabreichung von Antibiotika und die damit einhergehenden Infektionen mit anderen Wirkstoffen beeinflusst.

Die klinische Expression reicht von asymptomatischen Infektionen bei Kindern und Erwachsenen mit starker Restimmunität bis zu schwereren und lebensbedrohlichen Erkrankungen bei ungeschützten Neugeborenen und Säuglingen. Obwohl einige zuvor immunisierte Personen klassische klinische Symptome entwickeln, ist atypische Pertussis, die durch das Fehlen eines typischen Whoops und eine kürzere Hustendauer gekennzeichnet ist, bei Jugendlichen und Erwachsenen häufiger.

Bordetella parapertussis verursacht ein Pertussis-Syndrom, das dem von B ähnelt, aber normalerweise weniger schwerwiegend ist als dieses angemessene Anamnese.

Die Serologie wird in Australien häufig zur Diagnose von Pertussis eingesetzt, insbesondere bei Erwachsenen und Jugendlichen. Viele andere Länder, einschließlich der USA, akzeptieren keine serologische Diagnose von Pertussis, obwohl in jüngster Zeit mit verbesserter Standardisierung gefordert wurde, serologische Tests in die Falldefinition aufzunehmen.

Dies ermöglicht die Überwachung von Veränderungen in zirkulierenden endemischen Stämmen, einschließlich Variationen in Virulenzgenen, die die Wirksamkeit des Impfstoffs beeinflussen könnten. Derzeit ist eine Makrolidresistenz selten.

Idealerweise bleibt der Tupfer 10 Sekunden lang im hinteren Pharynx, bevor er zurückgezogen wird. Sowohl der linke als auch der rechte Nasopharynx können mit demselben Tupfer entnommen werden. Bei kleinen Kindern können Nasenwaschproben zufriedenstellend sein.

Halsabstriche sind weniger empfindlich und vordere Nasentupfer und Sputum sind inakzeptable Proben für die Kultur. Amies Transportmedium mit Holzkohle ist geeignet, wenn Proben innerhalb von 24 Stunden nach der Entnahme ausplattiert werden können. Der Transport sollte bei Raumtemperatur erfolgen. Platten dürfen nicht austrocknen. Sie sind kleine, gramnegative, Katalase-positive Coccobacillen.

Die Oxidase-Reaktion ist auch hilfreich bei der Differenzierung von B. Die meisten Laboratorien verwenden spezifische Antiseren zur Identifizierung von B. Die mittlere MHK der zwischen 1971 und 2006 gesammelten australischen Isolate blieb zwischen 0.

Eine erfolgreiche Isolierung hängt ab von: Stadium der Krankheit - die höchste Empfindlichkeit ist am Ende der Inkubationszeit, während des katarrhalischen Stadiums und zu Beginn des paroxysmalen Stadiums. Eine geringere Empfindlichkeit tritt auf, wenn Proben im paroxysmalen Stadium zwischen 3 und 6 Wochen entnommen und während der Rekonvaleszenz negativ entnommen werden.

Der Organismus wird nach der vierten Krankheitswoche selten wieder hergestellt. Die Bakterienbelastung ist bei Kindern höher. In jüngerer Zeit sind beflockte Tupfer verfügbar geworden, die eine verbesserte Probenentnahme ermöglichen. Vordere Nasen- und Rachenabstriche und klassische "Hustenplatten" werden für die Kultur nicht mehr empfohlen. Plattierungsgeschwindigkeit und Qualität des Mediums - Die Proben sollten sofort innerhalb von mindestens 4 Stunden nach der Entnahme auf hochwertige nichtselektive Medien für B plattiert werden.

Eine vorherige Antibiotikabehandlung wirkt sich negativ auf die Empfindlichkeit aus. Die negative Vorhersage ist variabel, aber bei jungen, nicht geimpften Kindern zu Beginn der Krankheit am höchsten. Der negative Vorhersagewert ist für sporadische Krankheitsfälle bei Erwachsenen, die im Allgemeinen später bei einer Krankheit auftreten, und bei zuvor geimpften Personen niedrig. Die Verwendung eines gut charakterisierten klinischen Isolats und / oder eines Stammes vom anerkannten Typ wie B. Viele Laboratorien verwenden das Ziel IS 481, um das Vorhandensein von B zu bestimmen.

IS 481, ein transponierbares Element, kann auch DNA umlagern und horizontal übertragen. Es wurde gezeigt, dass es in B vorhanden ist. Die klinischen Konsequenzen einer Fehldiagnose eines B. Die korrekte Identifizierung von B. Calciumalginat-Tupfern sollte nicht verwendet werden. Halsabstriche und Sputumproben können auch für Jugendliche und Erwachsene verwendet werden. Die Leistungsmerkmale von Tests mit diesen Proben sollten jedoch von jedem Labor validiert werden. Amies-Transportmedium mit Holzkohle stört die PCR nicht signifikant.

Zusätzliche Ziele wurden veröffentlicht, obwohl noch keine vollständig validiert wurden. Die PCR kann positiv bleiben, wenn die Kultur nach einer Antibiotikabehandlung negativ wird. Bidet et al. 25 untersuchten die Echtzeit-PCR-Messung der Persistenz von B. Eine australische Studie 26 zeigte, dass Rachenabstriche für die Diagnose durch PCR nützlich sind, aber diese Studie wurde nicht entwickelt, um die Positivitätsrate eines Probentyps mit dem anderen zu vergleichen.

Die Autoren warnten, dass die verwendete PCR-Methode ausreichend empfindlich sein sollte, um die geringere Anzahl von Organismen nachzuweisen, die wahrscheinlich in Rachenabstrichen vorhanden sind. Eine dänische Studie ergab keinen signifikanten Unterschied in der Empfindlichkeit zwischen peroralen Nasopharynxabstrichen und pernasalen Nasopharynxabstrichen.

In B. wurde über eine geringe Anzahl von IS 481-ähnlichen Elementen berichtet. Infizierte Personen, bei denen in der Vergangenheit bereits geimpft oder infiziert wurde, haben typischerweise weniger schwere Symptome und können weniger Organismen ausscheiden. Seitenanfang 3. Diese Berichte finden Sie unter http: Der Nachweis von fluoreszierenden Antigenen erfordert qualifiziertes Personal, geeignete Ausrüstung und ist arbeitsintensiv.

Der Vorteil ist ein schnelles Ergebnis, da kein einfacher Zugang zur PCR besteht. Aufgrund polyklonaler Antikörper gegen die normale orale und nasopharyngeale Flora gibt es jedoch eine beträchtliche Rate falsch positiver Ergebnisse.

Die Empfindlichkeit ist im Einklang mit der Kultur gering. Da dieser Test in australischen Labors nicht mehr weit verbreitet ist, wurde er nicht in die aktuelle Falldefinition aufgenommen. International besteht jedoch kein Konsens über die Rolle der Serologie bei der Diagnose von Pertussis. Die aktuelle CDC-Laborfalldefinition enthält keine Serologie, da sie der Ansicht ist, dass "keine serologische Methode zur Diagnose von Pertussis zwischen Laboratorien validiert oder für die diagnostische Verwendung in U akzeptiert wurde.

Die WHO akzeptiert eine Serokonversion oder einen signifikanten Anstieg des Antikörperspiegels, jedoch keinen einzigen hohen Titer. Tabelle 1. In Westaustralien wurde ein Pertussis-Ganzzell-IgA-Assay an pernasalen Aspiraten durchgeführt. Aufgrund technischer Probleme im Zusammenhang mit einer bestimmten UVP, die 2006 zu einer Überdiagnose der Pertussis führten, wurde in Australien von Ganzzell-Antigen-Assays zu solchen übergegangen, die PT allein oder in Kombination mit FHA verwenden.

Hersteller fügen zusätzliche Antigene wie FHA, Pertactin PRN und Fimbrien der Typen 2 und 3 hinzu, um die Empfindlichkeit ihrer Tests zu erhöhen. Dies führt jedoch zu einem Verlust der Spezifität.

PT-Antikörper sind spezifisch für Pertussis, aber Antikörper gegen FHA oder Ganzzellantigene können aufgrund von Infektionen mit anderen Bordetella-Arten, einschließlich B-Parapertussis, erzeugt werden. FHA kann mit anderen häufigen Krankheitserregern der Atemwege - Mycoplasma pneumoniae, Chlamydia pneumoniae und H influenzae - kreuzreagieren. Niederlande 1. Die Literatur legt nahe, dass PT-Antikörper am wenigsten betroffen sind und sich am schnellsten auflösen 43, 49 3.

Es wird angenommen, dass alle Pertussis-Infektionen bei Erwachsenen aufgrund einer vorherigen Exposition gegenüber Pertussis oder einer vorherigen Immunisierung wahrscheinlich wiederholte Infektionen sind. Bei kleinen Kindern sind serologische Reaktionen, insbesondere auf IgA, weniger zuverlässig, und es können falsch negative Ergebnisse auftreten.

Kommerzielle Kits: Dies ermöglicht eine genauere Interpretation und einen Vergleich der quantifizierten Titer 1 zwischen Laboratorien und unterstützt die Laboratorien bei der Bestimmung und Meldung geeigneter Schwellenwerte für die Serodiagnose von Infektionen.

Von der WHO zugelassene Standardpräparate können ab sofort erworben werden. Die alleinige Verwendung der klinischen Definition von Pertussis zur Definition von Positivkontrollen ist für die Testvalidierung aufgrund der geringen Spezifität nicht akzeptabel. Berichte finden Sie unter http: Serologische Tests auf Pertussis-Antigene, insbesondere Pertussis-Toxin PT, können empfindlich und spezifisch sein, obwohl kommerzielle Tests nicht vollständig standardisiert sind und es keine allgemein akzeptierten Korrelationen mit dem Schutz gibt.

Die Verfügbarkeit von WHO-Standards und Referenzseren hilft bei der Bestimmung der am besten geeigneten Schwellenwerte. In Übereinstimmung mit der internationalen Literatur wurde die derzeitige Definition erweitert, um eine signifikante PT-IgG-Reaktion in einen entsprechend validierten Test als Hinweis auf eine akute Infektion aufzunehmen.

Es ist wahrscheinlich, dass PT IgG in naher Zukunft der serologische Test der Wahl für die serologische Pertussis-Diagnose sein wird und nicht PT oder Ganzzell-IgA. Vereinfachte Empfehlungen von Müller et al. 3 fassen diese zusammen. Tabelle 2: Die Kombination einer einzelnen Serologie mit einer PCR oder einer gepaarten Serologie erhöhte die Empfindlichkeit mit einer damit verbundenen begrenzten Abnahme der Spezifität. Die meisten basieren auf bekannten Impfvirulenzfaktoren.

Die Serotypisierung mit Antikörpern gegen drei Oberflächenantigene unterteilt Isolate in vier Serotypen. Zwei dieser drei Antigene sind fimbrial und auch als Fim2 und Fim3 bekannt. Gentypisierung, die dritte Methode zur Typisierung von B.

Eine auf DNA-Sequenzen basierende Typisierung wird zunehmend verwendet, und Polymorphismen wurden in verschiedenen Genen gefunden, einschließlich der S1- und S3-Untereinheiten von Pertussis-Toxin ptx A und ptx C, Pertactin prn A, Trachealkolonisationsfaktor tcf A, fimbrialen Antigenen 2 und 3, fim 2 und f im 3.

Da die PCR die Isolatkultur ersetzt, kann die Verfügbarkeit von Kultursammlungen für epidemiologische Studien abnehmen, und es ist eine alternative molekularbasierte Typisierung erforderlich. Charakterisierung von Referenzmaterialien für menschliches Antiserum gegen Pertussis-Antigene durch eine internationale Verbundstudie. Clin Vac Immunol: Mattoo S und Cherry JD Molekulare Pathogenese, Epidemiologie und klinische Manifestationen von Atemwegsinfektionen aufgrund von Bordetella pertussis und anderen Bordetella-Unterarten Clin.

Labordiagnose der Pertussis: J Clin Microbiol 1997; 35:

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